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多肽生產(chǎn)方法之合成法是在人們已獲知某種有特定活性的氨基酸組成的序列,利用其生產(chǎn)特定活性肽的方法。合成法制備多肽主要分為化學(xué)合成法、酶合成法和基因重組合成法[8,9]。(一)化學(xué)合成法化學(xué)法合成多肽主要是通過(guò)固相或液相合成法制取所需的生物活性多肽。固相合成法常用于實(shí)驗(yàn)室,用于蛋白質(zhì)、多肽等方面的研究,其特點(diǎn)是產(chǎn)品純度高,但成本高、產(chǎn)量低,直接合成的序列短、合成效率低,同時(shí)合成試劑的毒性較大,因此此法一般僅限于實(shí)驗(yàn)室制備。固相合成法基本上只能用于氨基酸數(shù)目較少、分子量較小的多肽的...
多肽合成儀以固相合成為反應(yīng)原理,在密閉的防爆玻璃反應(yīng)器中使氨基酸按照已知順序不斷添加、反應(yīng)、合成,操作Z終得到多肽載體。固相合成法,大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。那么多肽合成的步驟是如何的呢?下面讓我們一起來(lái)了解一下吧。1、樹(shù)脂的選擇及氨基酸的固定用于多肽合成的高分子的載體主要有3類:交聯(lián)聚苯乙烯;聚酰胺;聚乙烯乙二醇脂類樹(shù)脂。氨基酸的固定主要是通過(guò)保護(hù)的氨基酸的羧基同樹(shù)脂的反應(yīng)基團(tuán)之間形成共價(jià)鍵來(lái)實(shí)現(xiàn)。2、氨基、羧基、側(cè)鏈的保護(hù)及脫除要成功合成具有特定的氨基酸順序的多肽,...
多肽是α-氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物,它也是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物。由兩個(gè)氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽,同理類推還有三肽、四肽、五肽等。通常由三個(gè)或三個(gè)以上氨基酸分子脫水縮合而成的化合物都可以成為叫多肽。一.固相合成法、液相合成法用這種方法生產(chǎn)肽的企業(yè)在美國(guó)硅谷就有一家。他們主要是購(gòu)買世界上一些精細(xì)化工廠生產(chǎn)的氨基酸為原料定向合成某種單肽,屬醫(yī)藥原料中間體,主要用于西藥配方,以增強(qiáng)藥效、增強(qiáng)人體對(duì)藥的吸收速度和吸收率。二.酸解法或堿解法這種肽主要出現(xiàn)在日本。...
多肽可以說(shuō)廣泛存在于生物系統(tǒng)中,是信號(hào)分子、傳輸分子,也是消化分子。作為信號(hào)分子,多肽控制生物體的生物功能,如細(xì)胞分裂、交配、趨化性、痛覺(jué)、生長(zhǎng)和免疫力,多肽合成已經(jīng)成為生物化學(xué)、藥理學(xué)、免疫學(xué)和生物物理研究最有力的工具之一;作為傳輸分子,多肽能促進(jìn)離子穿過(guò)細(xì)胞膜通道;作為消化分子,多肽在細(xì)胞和完整有機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)吸收中發(fā)揮重要作用。除此之外,多肽也可以作為保護(hù)劑,如具有優(yōu)良抗菌和抗病毒性能的抗生素。而現(xiàn)在,多肽是重要的商業(yè)實(shí)體,己經(jīng)被用在不同的治療領(lǐng)域,如糖尿病、過(guò)敏、抗感染、...
今天為大家分享一下關(guān)于多肽溶解的方法,下面讓我們一起來(lái)了解一下吧。1.多肽溶解中的主要問(wèn)題是二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成。雖然疏水肽鏈二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成更明顯,但除了最短的肽鏈外,該現(xiàn)象發(fā)生在幾乎所有肽鏈,與極性無(wú)關(guān)。因此,溶解多肽的第一個(gè)原則是用無(wú)菌的蒸餾水或去離子水(如果條件允許則用無(wú)氧水)。多肽溶液可能遇到細(xì)菌降解。為避免該現(xiàn)象的發(fā)生,多肽應(yīng)溶解在無(wú)菌的蒸餾水中,或者用0.45或0.2μm孔徑的濾膜過(guò)濾除菌。包含Cys、Met、Trp的多肽特別容易氧化,因此應(yīng)該溶于無(wú)氧的水中。無(wú)氧水可以...
多肽合成儀以固相合成為反應(yīng)原理,在密閉的防爆玻璃反應(yīng)器中使氨基酸按照已知順序(序列,一般從C端-羧基端向N端-氨基端)不斷添加、反應(yīng)、合成,操作最終得到多肽載體。固相合成法,大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。為了防止副反應(yīng)的發(fā)生,參加反應(yīng)的氨基酸的側(cè)鏈都是保護(hù)的。羧基端是游離的,并且在反應(yīng)之前必須活化。固相合成方法有兩種,即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多優(yōu)勢(shì),現(xiàn)在大多采用Fmoc法合成,但對(duì)于某些短肽,tBoc因其產(chǎn)率高的優(yōu)勢(shì)仍然被很多企業(yè)所采用。多肽合成儀...
多肽合成是氨基酸重復(fù)添加的過(guò)程,通常從C端向N端(氨基端)進(jìn)行合成。多肽固相合成的原理是將目的肽的第一個(gè)氨基酸C端通過(guò)共價(jià)鍵與固相載體連接,再以該氨基酸N端為合成起點(diǎn),經(jīng)過(guò)脫去氨基保護(hù)基和過(guò)量的已活化的第二個(gè)氨基酸進(jìn)行反應(yīng),接長(zhǎng)肽鏈,重復(fù)操作,達(dá)到理想的合成肽鏈長(zhǎng)度,最后將肽鏈從樹(shù)脂上裂解下來(lái),分離純化,獲得目標(biāo)多肽。1、Boc多肽合成法Boc方法是經(jīng)典的多肽固相合成法,以Boc作為氨基酸α-氨基的保護(hù)基,芐醇類作為側(cè)鏈保護(hù)基,Boc的脫除通常采用三(TFA)進(jìn)行。多肽合成時(shí)...
多肽合成又叫肽鏈合成,是一個(gè)固相合成順序一般從C端(羧基端)向N端(氨基端)合成。過(guò)去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法。多肽的合成主要分為兩條途徑:化學(xué)合成多肽和生物合成多肽。多肽合成就是如何把各種氨基酸單位按照天然物的氨基酸排列順序和連接方式連接起來(lái)。由于氨基酸在中性條件下是以分子內(nèi)的兩性離子形式(H3+NCH(R)COO-)存在,因此,氨基酸之間直接縮合形成酰胺鍵的反應(yīng)在一般條件下是難于進(jìn)行的。多肽合成方法分類多肽的合成主要分為兩條途徑:化學(xué)合成多肽和生物合成多肽...