運(yùn)行原理:
多肽合成儀以固相合成為反應(yīng)原理,在密閉的防爆玻璃反應(yīng)器中使氨基酸按照已知順序(序列,一般從C端-羧基端 向 N端-氨基端)不斷添加、反應(yīng)、合成,操作最終得到多肽載體。固相合成法,大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。為了防止副反應(yīng)的發(fā)生,參加反應(yīng)的氨基酸的側(cè)鏈都是保護(hù)的。羧基端是游離的,并且在反應(yīng)之前必須活化。
多肽合成儀基本元件:
反應(yīng)器
數(shù)百年來,制藥業(yè)的反應(yīng)器/反應(yīng)釜 設(shè)備以玻璃材質(zhì)最為常見,因其*透明且耐腐蝕,而被眾多化學(xué)、生物學(xué)專家沿用。多肽合成的過程需要操作人員直觀監(jiān)測(cè),同時(shí)合成后可進(jìn)行在線切割(切割試劑TFA的強(qiáng)腐蝕性對(duì)反應(yīng)器材質(zhì)有了極大限制),這些要求限制反應(yīng)器以玻璃材質(zhì)最為適用。 玻璃材質(zhì)的反應(yīng)器在制造工藝上有極大的難度限制:①燒制工藝:磨口精度要求高,正如很多國產(chǎn)設(shè)備都無法達(dá)到要求出現(xiàn)漏液漏氣現(xiàn)象,玻璃壁均勻程度等。②配合攪拌柄以及密封裝置的成套加工工藝③防爆處理
氨基酸儲(chǔ)罐
用來儲(chǔ)存氨基酸粉末或預(yù)先活化溶解好的氨基酸溶液。小型合成儀的氨基酸儲(chǔ)罐一般在20-40個(gè)之間以保證無人監(jiān)控下的全自動(dòng)縮合反應(yīng)順利進(jìn)行。大型合成儀根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模的不同,配置也各不相同。
溶劑儲(chǔ)罐
用來儲(chǔ)存多肽合成過程中需要的有機(jī)溶液,如DMF,PIP等。
量筒
用來測(cè)量氨基酸溶液與其他試劑的合成量,需有精密型傳感器設(shè)計(jì)刻度并回傳信息至電腦控制程序。因早期的恒壓法測(cè)定偏差過大且操作繁瑣,而采用此方法測(cè)定。觸發(fā)器的數(shù)量根據(jù)不同客戶的要求而定,不同的品牌也略有不同。
轉(zhuǎn)液瓶
感應(yīng)器
多端觸發(fā)器自感應(yīng)定量量取法,直觀、科學(xué)、相對(duì)誤差低。代替早期的恒壓法,避免了每日進(jìn)行的大量的數(shù)學(xué)運(yùn)算,操作更為簡(jiǎn)單,測(cè)定誤差值可控制在1%。
廢液桶
廢液桶通常選擇容積較大的HDPE桶,保證通風(fēng)良好,同時(shí)需安裝感應(yīng)器裝置時(shí)刻檢測(cè)廢液情況,避免溢出。
控制配件
電磁閥
多肽合成儀中的電磁閥屬于敏感配件,其控制液路的串聯(lián)與閉路,在氨基酸轉(zhuǎn)移與量取,溶劑轉(zhuǎn)移與量取兩步驟中起到至關(guān)重要的作用。不同品牌的合成儀對(duì)電磁閥的設(shè)計(jì)與排布也略有不同。
控制面板
控制面板內(nèi)往往含有光敏組建,部分控制電磁閥以及感應(yīng)器控制組。與電腦主機(jī)的控制系統(tǒng)、合成儀統(tǒng)一的鏈接在一起,完成多肽合成的全過程。
軟件系統(tǒng)
多肽合成儀的操作軟件。不同品牌合成儀所注冊(cè)的軟件也不同。