多肽在-20℃很穩(wěn)定,特別是冷凍干燥并保存在干燥器中,在將它們暴露于空氣之前, 冷凍干燥多肽可以放于室溫。
這將是濕度影響減少,當(dāng)無(wú)法冷凍干燥時(shí),好的方法是以小的工作樣量存放。 對(duì)于含Cys, Met orTrP的多肽,脫氧緩沖劑對(duì)其溶解不可少,因?yàn)檫@種多肽可易空氣氧化, 在封瓶前,慢慢流過(guò)多肽的氮?dú)饣驓鍤庖矔?huì)降低氧化作用。
含Gln或Asn的多肽也容易降解,所有這些肽與不含這些有問(wèn)題解苷的那些肽相比,生命期有限。
多肽的保存和操做
包裝 1mg或更少的多肽按凈重包裝,聲明的小瓶重不含相關(guān)抗離子和水。 例如,氨基酸分析決定的肽含量是80%, 在1mg樣品中,那么瓶中毛重是1.25mg。大量的多肽以毛重算。標(biāo)出的重量含相關(guān)抗離子和水, 例如,25mg樣品中肽百分比為90%,那么,實(shí)際肽量為25mg×90%=22.5mg,不要把肽含量和純度搞混了。肽的純度可能是100%, 而肽含量相關(guān)帶電基團(tuán)(如Arg, Lys )的抗離子量和肽新水性決定。這是合成肽的本身特性。
凍干肽的保存
所有產(chǎn)品應(yīng)存于冰箱, 最好為-20℃。多數(shù)肽以此方法可以存放幾年不變。
肽溶液的保存
溶液肽遠(yuǎn)比凍干形式不穩(wěn)定,溶液應(yīng)為中性pH(pH5-7), -20℃保存的,為避免樣品的反復(fù)凍融, 最好分成小樣存放。一份樣品融凍后未用完, 應(yīng)扔掉,細(xì)菌降解有時(shí)會(huì)成為溶液肽的麻煩, 因此肽應(yīng)溶于無(wú)菌水, 或肽溶液用0.2μ M濾膜過(guò)濾。
多肽應(yīng)用和保存
多肽具廣泛的溶解性。多肽不溶的主要問(wèn)題是形成二級(jí)結(jié)構(gòu)。除了最太肽外,這點(diǎn)都會(huì)發(fā)生, 在有多重疏水殘基的肽中更顯著。鹽會(huì)促進(jìn)二級(jí)結(jié)構(gòu)形成。我們建議先在無(wú)菌蒸餾水或去離子中溶解多肽。
如需要增加溶解率, 可用聲處理。溶解仍有問(wèn)題, 加少量稀乙酸(10%)或氨水,會(huì)便于溶解。要長(zhǎng)期保存多肽, 最好冷凍干燥,冷干粉可在-20℃或更低存放幾年而很少或無(wú)降解。
溶液中的多肽極不穩(wěn)定。 多肽易受細(xì)菌降解,應(yīng)用無(wú)菌純化水溶解。含有Met, Cgs或Try殘基的多肽溶液由于氧化,壽命有限。應(yīng)溶于無(wú)氧溶劑, 為防止重復(fù)凍融的破壞, 建議溶解少量的肽以便實(shí)驗(yàn),其余多肽以固體形成保存。