多肽合成(化學)方法,包括液相和固相兩種方法。液相多肽合成方法現(xiàn)在主要采用BOC和Z兩種保護方法,現(xiàn)在主要應用在短肽合成,如阿斯巴甜,力肽,催產(chǎn)素等,其相對與固相多肽合成,具有保護基選擇多,成本低廉,合成規(guī)模容易放大的許多優(yōu)點。
下面讓我們再來了解一下多肽的二級結構分析方法吧
1.圓二色譜(CD)
圓二色譜是一種特殊的吸收譜,它通過測量蛋白質(zhì)等生物大分子的圓二色光譜,從而得到生物大分子的二級結構,簡單、快捷,廣泛應用在蛋白質(zhì)折疊,蛋白質(zhì)構象研究,酶動力學等領域。圓二色譜紫外區(qū)段(190-240nm),主要生色團是肽鏈,這一波長范圍的CD譜包含了生物大分子主鏈構象的信息。α-螺旋構象的CD譜在222nm、208nm處呈負峰,在190nm附近有一正峰。β-折疊構象的CD譜,在217-218nm處有一負峰,在195-198nm處有一強的正峰。無規(guī)則卷曲構象的CD譜在198nm附近有一負峰,在220nm附近有一小而寬的正峰。
2.核磁共振(NMR)
隨著二維、三維以及四維NMR的應用,分子生物學、計算機處理技術的發(fā)展,使NMR逐漸成為大分子結構物質(zhì)分析的主要方法之一。NMR可用于確定氨基酸序列、分布以及構象。目前,NMR在分析分子中含少于30個氨基酸的小肽時是非常有用的,分析結果快速準確。
3.X-衍射
X-衍射可獲得有關化合物晶型的直接信息,而且可以判斷相對與構型。
多肽標記及修飾
目前多肽標記及修飾的內(nèi)容非常多,廣泛應用在多肽藥物,多肽生物學,多肽抗體以及多肽試劑的研究中。目前應用廣泛的有:非放射性核素標記(C13,H2),熒光標記(FAM,F(xiàn)ITC),生物素標記,磷酸化修飾等。